રિકોમ્બિનન્ટ સ્પાઇક પ્રોટીન પર આધારિત પોર્સિન એક્યુટ ડાયેરિયા સિન્ડ્રોમ કોરોનાવાયરસ IgG એન્ટિબોડીની શોધ માટે પરોક્ષ ELISA પદ્ધતિનો વિકાસ

પોર્સિન એક્યુટ ડાયેરિયા સિન્ડ્રોમ કોરોનાવાયરસ (SADS-CoV) એ એક નવો શોધાયેલ પોર્સિન એન્ટરિક પેથોજેનિક કોરોનાવાયરસ છે જે નવજાત ડુક્કરમાં પાણીયુક્ત ઝાડાનું કારણ બની શકે છે અને ડુક્કર ઉદ્યોગને નોંધપાત્ર આર્થિક નુકસાન પહોંચાડી શકે છે.હાલમાં, SADS-CoV ચેપ અને રસીની અસરકારકતાનું મૂલ્યાંકન કરવા માટે કોઈ યોગ્ય સેરોલોજીકલ પદ્ધતિ નથી, તેથી આ ઉણપને ભરવા માટે અસરકારક એન્ઝાઇમ-લિંક્ડ ઇમ્યુનોસોર્બન્ટ એસે (ELISA) નો ઉપયોગ કરવાની તાત્કાલિક જરૂર છે.અહીં, માનવ IgG Fc ડોમેન સાથે SADS-CoV સ્પાઇક (S) પ્રોટીનને વ્યક્ત કરતું રિકોમ્બિનન્ટ પ્લાઝમિડ રિકોમ્બિનન્ટ બેક્યુલોવાયરસ ઉત્પન્ન કરવા માટે બનાવવામાં આવ્યું હતું અને HEK 293F કોષોમાં વ્યક્ત કરવામાં આવ્યું હતું.S-Fc પ્રોટીન પ્રોટીન G રેઝિનથી શુદ્ધ થાય છે અને માનવ-વિરોધી Fc અને એન્ટિ-SADS-CoV એન્ટિબોડીઝ સાથે પ્રતિક્રિયાશીલતાને જાળવી રાખે છે.પછી S-Fc પ્રોટીનનો ઉપયોગ પરોક્ષ ELISA (S-iELISA) વિકસાવવા અને S-iELISA ની પ્રતિક્રિયા પરિસ્થિતિઓને ઑપ્ટિમાઇઝ કરવા માટે કરવામાં આવ્યો હતો.પરિણામે, ઇમ્યુનોફ્લોરેસેન્સ એસે (IFA) અને વેસ્ટર્ન બ્લોટિંગ દ્વારા પુષ્ટિ થયેલ 40 SADS-CoV નેગેટિવ સેરાના OD450nm મૂલ્યનું વિશ્લેષણ કરીને, કટ-ઓફ મૂલ્ય 0.3711 હોવાનું નક્કી કરવામાં આવ્યું હતું.S-iELISA ની અંદર અને તેની વચ્ચેના 6 SADS-CoV પોઝિટિવ સેરાના વિવિધતાના ગુણાંક (CV) બધા 10% કરતા ઓછા હતા.ક્રોસ-રિએક્ટિવિટી ટેસ્ટ દર્શાવે છે કે S-iELISA ને અન્ય પોર્સિન વાયરસ સેરા સાથે કોઈ ક્રોસ-રિએક્ટિવિટી નથી.વધુમાં, 111 ક્લિનિકલ સીરમ નમૂનાઓની શોધના આધારે, IFA અને S-iELISA નો એકંદર સંયોગ દર 97.3% હતો.સીરમના 7 અલગ-અલગ OD450nm મૂલ્યો સાથેના વાયરસ નિષ્ક્રિયકરણ પરીક્ષણે દર્શાવ્યું હતું કે S-iELISA દ્વારા શોધાયેલ OD450nm મૂલ્ય વાયરસ તટસ્થતા પરીક્ષણ સાથે હકારાત્મક રીતે સંકળાયેલું હતું.છેલ્લે, S-iELISA 300 પિગ ફાર્મ સીરમ નમૂનાઓ પર કરવામાં આવ્યું હતું.અન્ય પોર્સિન એન્ટરવાયરસની વાણિજ્યિક કિટ દર્શાવે છે કે SADS-CoV, TGEV, PDCoV અને PEDV ના IgG પોઝિટિવ દર અનુક્રમે 81.7%, 54% અને 65.3% હતા., 6%, અનુક્રમે.પરિણામો દર્શાવે છે કે S-iELISA ચોક્કસ, સંવેદનશીલ અને પુનઃઉત્પાદનક્ષમ છે અને તેનો ઉપયોગ ડુક્કર ઉદ્યોગમાં SADS-CoV ચેપને શોધવા માટે થઈ શકે છે.આ લેખ કોપીરાઈટ દ્વારા સુરક્ષિત છે.બધા હકો અમારી પાસે રાખેલા છે.


પોસ્ટનો સમય: જૂન-22-2021